多肽疫苗是按照病原体抗原基因中已知或预测的某段抗原表位的氨基酸序列，通过化学合成技术制备的疫苗。其克服了传统疫苗的许多缺点，可大规模化学合成，易于纯化，在人体应用中较为安全。

基于脂质的递送系统已被确立为诱导体液和细胞免疫反应的强大递送系统，目前应用最为广泛的是脂质体和脂质纳米粒（lipid nanoparticle，LNP）。

本研究以基于新冠病毒Ｓ蛋白的Ｓ1亚基受体结合结构域区段上Ｓ450-471（NYLYRLFRKSLKPEERDISTE）构建的分支多肽作为模型抗原，选择脂质体作为免疫递送系统构建多肽疫苗，设计构建了脂质体的处方工艺。

图1 文章首页

精密称取大豆卵磷脂150mg、胆固醇30mg，置于圆底烧瓶中，加入10ml无水乙醇，常温下搅拌使其溶解形成澄明溶液，将圆底烧瓶连接到旋转蒸发仪，在45度水浴条件下去除乙醇形成透明薄膜。加入含有多肽抗原（2mg·ml^-1）的PBS溶液5ml和1%壳聚糖溶液5ml震荡使薄膜充分水化，形成乳白色半透明溶液。然后置于超声波破碎仪中，超声40次（30W，工作4s，间歇4s，冰水浴），再将得到的半透明溶液置于高压均质机中（100000KPa）循环6min得到脂质体。取1ml稀释100倍，测定其粒径分布和多分散系数。

图2 3批次脂质体的验证结果

图3 脂质体透射电镜（TEM）检测结果(x100000)

薄膜分散法3个批次制备的脂质体平均粒径为132nm、PDI值为17.8%、Zeta电位为35.6mV，符合实验设计的要求，说明该最优处方可靠。同时，透射电镜下观察脂质体的结构分散性良好，形态规整，近似圆形，粒径大小在100nm左右。

这种纳米疫苗可能具有良好的临床应用潜力，为基于脂质体的新冠多肽疫苗研发提供了良好的研究基础！

Jin250701M